Comment identifier des espèces séparées par chromatographie sur couche mince ?
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La chromatographie nous a permis de séparer les constituants d'un mélange homogène grâce à leur solubilité dans l'éluant choisi. Ces espèces chimiques ont ainsi migré à des hauteurs différentes sur le support. L'analyse du chromatogramme obtenu est alors simple :
• Si deux tâches sont à la même hauteur par rapport à la ligne de base sur un chromatogramme alors elles représentent la même espèce chimique (analyse comparative).
La séparation des constituants peut faire appel
à la notion de rapport frontal d'une
espèce chimique.
Il s'agit du rapport entre la distance de
migration de l'espèce chimique et la distance de
migration du solvant :
Après avoir calculé le rapport frontal pour
chacune des tâches issues d'un mélange, on le
compare aux données existantes dans les tables de rapports
frontaux correspondant à
l'éluant choisi : deux rapports frontaux égaux pour le
même éluant correspondent
à la même
espèce chimique.
Considérons le colorant du sirop de
menthe et trois
témoins : rouge (E122),
bleu (E131)
et jaune
(E102).
Le chromatogramme permet de séparer le
colorant vert du sirop en deux
constituants : un colorant jaune pur
et un colorant bleu pur. Par comparaison, le colorant
jaune correspond au colorant jaune témoin (E102) et
le colorant bleu, au colorant bleu témoin (E131). Le
colorant rouge (E122) n'est pas présent dans le
colorant vert.
Remarque :
Les rapports frontaux des colorants bleu
et jaune sont :
R bleu = d bleu /d BS et R jaune = d jaune /d BS.
S'il n'y avait eu aucun témoin, il aurait suffit de réaliser la chromatographie du colorant vert seul, de calculer les rapports frontaux ci-dessus et d'utiliser le résultat des tables avec l'éluant choisi pour déterminer la composition du mélange.
Le chromatogramme issu de la chromatographie révèle différentes tâches. Les tâches du mélange sont comparées aux tâches des différents témoins. L'identification est possible lorsque deux tâches sont à la même hauteur : c'est une analyse comparative.
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