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Réalisation de préparations microscopiques

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Objectifs

Le microscope optique permet d'agrandir l'image d'un objet. Un objet, invisible à l'œil nu, peut alors être observable.
Peut-on tout examiner ?
Que peut-on observer ?
Comment réaliser sa préparation microscopique ?

1. Le matériel

La préparation microscopique nécessite le matériel suivant :
– lames de verre porte-objets, propres et sèches ;
– lamelles de verre couvre-objets, propres et sèches ;
(Remarque : les lames et les lamelles, très fragiles, sont à manipuler avec délicatesse.)
– papier d'essuyage optique, ou absorbant, afin de nettoyer les oculaires, les objectifs, les lentilles, les lames et les lamelles ;
– compte-gouttes propres et secs, servant au prélèvement de l'eau et des objets liquides ;
– coffret de microscopie contenant le matériel et les produits nécessaires à la réalisation des préparations microscopiques (colorants, éthanol dénaturé à 95 °, éclaircissant, etc.) ;
– microtome de précision, servant aux coupes régulières et précises d'objets solides ;
– rasoir de coupe ;
– moelle de sureau à utiliser avec le microtome.

À cette liste, il convient d'ajouter des pinces fines et des étiquettes à coller sur les lames. L'objet à observer peut être une coupe fine ou un objet naturellement fin.

2. Préparation et montage de l'objet à observer

Deux procédures sont possibles en fonction de l'état de l'objet.

a. Préparation de l'objet

• Objet solide

– Déposer une lame propre sur la paillasse.
– Déposer une goutte d'eau ou de liquide de préparation au centre de la lame avec le compte-gouttes.
– Prélever un fragment de l'objet (plus petit que la lamelle) à l'aide de pinces fines, du microtome ou du rasoir de coupe.
– Placer délicatement sur cette préparation, et bien à plat, ce fragment avec les pinces fines.

• Objet liquide

– Prélever le liquide à observer avec le compte-gouttes.
– Prendre une lame propre sur la paillasse.
– Déposer une goutte de ce liquide au centre de la lame.

b. Montage de la préparation microscopique

Une fois l'objet correctement placé sur la lame, il est recouvert d'une lamelle de verre :

– poser un des bords de la lamelle sur la lame ;
– incliner la lamelle d'environ 45° ;
– l'approcher au contact de l'eau ou du liquide de préparation ;
– la lâcher délicatement pour chasser les bulles d'air ;
– absorber le liquide en excès à l'aide du papier absorbant ;
– dans le cas contraire, poser une goutte sur le bord de la lamelle à l'aide du compte-gouttes, et éliminer l'excès.

• Coller une étiquette sur la lame et y inscrire le nom et/ou le numéro de la lame .
• Monter la préparation microscopique au centre de la platine du microscope.
• Observer en respectant les consignes d'utilisation du microscope.

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